一种具有杀菌活性的化合物恶喹酸在农业上的应用的制作方法
本发明涉及农业病害防治领域，具体是一种具有杀菌活性的化合物恶喹酸在农业上的应用。
背景技术：
恶喹酸(oxolinicacid)，又名奥索林酸、噁喹酸等，化学名称：1-乙基-6,7-亚甲氧基-4-喹啉铜-3-羧酸。原药低毒，对皮肤无刺激作用，对眼睛有轻度刺激作用。无致敏作用，动物试验无致畸、致癌、致突变作用。恶喹酸属第二代喹啉酮类杀菌剂，作用机制为通过抑制dna螺旋酶从而影响dna的正常形态与功能(正常复制)而达到抗菌的目的，dna是以高度螺旋卷曲折叠的形态存在于菌体内，如果不卷聚。则其长度远远超过细胞的若干倍，根本无法容纳在细胞壁内，也无法正常的dna复制、转运与重组。dna螺旋酶的作用就是使dna保持高度的卷聚状态，由于喹诺酮类抗菌作用机制与内酰胺类，氨基糖苷类等其他抗生素作用机制不同，因此无明显交叉耐药现象。
有文献报道恶喹酸对黄瓜细菌性角斑病和番茄青枯病有良好的防效，黄瓜细菌性角斑病由细菌丁香假单胞杆菌黄瓜角斑致病变种侵染引起，番茄青枯病由细菌青枯假单胞菌侵染引起。本发明所述的芒果细菌性角斑病由油菜黄单胞杆菌芒果致病变种侵染引起，菜豆细菌性疫病由黄单孢杆菌侵染引起，白菜软腐病由欧文菌属菌体侵染所致，水稻白叶枯病由稻黄单胞菌水稻生致病变种侵染所致，柑橘溃疡病由黄极毛杆菌侵染所致，马铃薯黑胫病由胡萝卜软腐欧文氏菌马铃薯黑胫亚种细菌侵染所致，水稻基腐病由欧氏杆菌属细菌欧文氏菌玉米致病变种侵染所致，梨枝枯病是由欧氏杆菌属梨火疫病菌侵染所致，猕猴桃溃疡病是由丁香假单抱杆菌猕猴桃致病变种侵染所致。
目前国内还没有关于恶喹酸作为农药的登记信息。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种具有杀菌活性的化合物恶喹酸在农业上的新应用。发明人通过大量生测实验发现恶喹酸对多种植物病害表现出较好的抑制作用。本发明采用以下技术方案：
一种具有杀菌活性的化合物恶喹酸在农业上的应用，所述的化合物恶喹酸的结构式为：
所述的化合物用于防治芒果细菌性角斑病、菜豆细菌性疫病、白菜软腐病、水稻白叶枯病、柑橘溃疡病、马铃薯黑胫病、水稻基腐病、梨枝枯病和猕猴桃溃疡病。
所述的恶喹酸作为活性成分与农药助剂、填料或溶剂配制成农药上允许的任意一种剂型，或所述的恶喹酸化合物和其他农药复配城农药上允许的任意一种剂型。
所述的剂型优选悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、颗粒剂、水乳剂，微乳剂或超低容量液剂。
所述化合物恶喹酸在上述剂型中的质量百分比为1-80％。
所述化合物恶喹酸的使用剂量为30-60ga.i./hm2。
本发明在大量实验的基础上，发现了恶喹酸在防治芒果细菌性角斑病、菜豆细菌性疫病、白菜软腐病、水稻白叶枯病、柑橘溃疡病、马铃薯黑胫病、水稻基腐病、梨枝枯病和猕猴桃溃疡病上有突出的效果，作为杀菌剂用药量少、持效期长、不易产生抗性，是无公害果蔬生产的优秀药剂。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明的技术方案和技术效果做进一步说明。
本发明所述的实施方式不局限于实施例表述的范围。
本实验采用室内杀菌活性测定和田间试验相结合的方法。先通过室内杀菌活性测定，再进行田间试验，具体的实施如下。
实施例1恶喹酸的室内杀菌活性测定
室内抑菌效果测定方法：采用浊度法测定杀菌组合物对芒果细菌性角斑病、菜豆细菌性疫病、白菜软腐病、水稻白叶枯病、柑橘溃疡病、马铃薯黑胫病、水稻基腐病、梨枝枯病和猕猴桃溃疡病的抑制作用。试验遵照国家行业标准《nyt1156.16-2006农药室内生物测定试验准则杀菌剂第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法》，稀释成不同浓度的药剂母液，充分震荡混匀后，将不同体积的药剂母液加入装有50mlnb培养基的250ml规格三角瓶中，配成不同浓度的含药培养基，对照加同体积无菌水，充分混匀后备用。将培养好的病菌稀释到100ntu。每瓶含药培养基接种50μl种子液，于30℃200rpm培养24h后，分别测各瓶的浑浊度值。测得的数据输入excel表格，采用以下公式计算药剂在各浓度下对病菌的生长抑制率。
将恶喹酸按照上述方法进行室内杀细菌活性测定，计算ec50，测得的数据如表1所示。
表1恶喹酸对9种细菌病害的室内杀菌活性
表1所示为恶喹酸对芒果细菌性角斑病、菜豆细菌性疫病、白菜软腐病、水稻白叶枯病、柑橘溃疡病、马铃薯黑胫病、水稻基腐病、梨枝枯病和猕猴桃溃疡病这9个细菌病菌的室内生测结果，ec50值均在2.5mg/l以下，杀菌效果突出，表明恶喹酸在杀细菌方面有良好的作用。
本发明实验者将恶喹酸作为活性成分分别制成了20％恶喹酸悬浮剂，80％恶喹酸可湿性粉剂，12％恶喹酸水分散粒剂，1％恶喹酸颗粒剂，5％恶喹酸水乳剂，25％恶喹酸微乳剂和20％恶喹酸超低容量液剂进行这9种细菌病害的田间药效实验。下面结合制剂实施例说明以恶喹酸为有效成分制备的农药制剂对上述的八种细菌的田间药效实验情况。
制备的农药制剂实施例如下：
制剂实施例一：20％恶喹酸悬浮剂
恶喹酸20％，木质素磺酸盐2％，脂肪醇聚氧乙烯醚3％，乙二醇5％，硅酸镁铝1％，黄原胶0.15％，有机硅消泡剂0.4％，水补足100％。
制剂实施例二：80％恶喹酸可湿性粉剂
恶喹酸80％，萘磺酸盐5％，苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚磷酸酯3％，十二烷基硫酸钠2％，白炭黑4％，高岭土补足100％。
制剂实施例三：12％恶喹酸水分散粒剂
恶喹酸12％，木质素磺酸盐3％，烷基聚氧乙烯磺酸盐3％，白炭黑3％，硫酸钠10％，聚乙烯醇0.1％，高岭土补足100％。
制剂实施例四：1％恶喹酸颗粒剂
恶喹酸1％，聚羧酸盐2％，木质素磺酸钙4％，聚乙烯醇3.5％，聚酯树脂0.5％，阿拉伯胶2％，砖渣补至100％。
制剂实施例五：5％恶喹酸水乳剂
恶喹酸5％，二甲基癸酰胺8％，二甲苯5％，苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚4％，脂肪醇聚氧乙烯醚甲醛缩聚物硫酸盐2.5％，尿素5％，水补足100％。
制剂实施例六：25％恶喹酸微乳剂
恶喹酸25％，环己酮10％，二甲基癸酰胺10％，脂肪醇聚氧乙烯醚3，脂肪醇聚氧乙烯醚甲醛缩聚物硫酸盐5％，十二烷基苯磺酸钙4％，水补足100％。
制剂实施例七：20％恶喹酸超低容量液剂
恶喹酸20％，二甲基癸酰胺15％，脂肪醇聚氧乙烯醚4％，十二烷基苯磺酸钙5％，溶剂油补足100％。
将上述的农药制剂实施例对芒果细菌性角斑病、菜豆细菌性疫病、白菜软腐病、水稻白叶枯病、柑橘溃疡病、马铃薯黑胫病、水稻基腐病、梨枝枯病和猕猴桃溃疡病进行田间药效试验。
实施例2防治芒果细菌性角斑病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为6％春雷霉素可湿性粉剂及空白清水。
2.试验方法：实验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于2018年6月在海南省东方市八所镇进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表2：
表2恶喹酸对芒果细菌性角斑病药效试验
从表2可以看出，恶喹酸农药制剂对芒果细菌性角斑病的防治效果优于对照药剂6％春雷霉素可湿性粉剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例3防治菜豆细菌性疫病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为3％中生菌素可湿性粉剂及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于2018年7月在河北省唐山市乐亭县古河乡进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表3：
表3恶喹酸对菜豆细菌性疫病药效试验
从表3可以看出，恶喹酸农药制剂对菜豆细菌性疫病的防治效果优于对照药剂3％中生菌素可湿性粉剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例4防治白菜软腐病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为3％中生菌素可湿性粉剂及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于2017年11月在河北省张家口市怀安县进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表4：
表4恶喹酸对白菜软腐病药效试验
从表4可以看出，恶喹酸农药制剂对白菜软腐病的防治效果优于对照药剂3％中生菌素可湿性粉剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例5防治水稻白叶枯病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为20％叶枯唑可湿性粉剂及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于2018年5月在浙江省绍兴市新昌县回山镇进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表5：
表5恶喹酸对水稻白叶枯药效试验
从表5可以看出，恶喹酸农药制剂对水稻白叶枯病的防治效果优于对照药剂20％叶枯唑可湿性粉剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例6防治柑橘溃疡病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为80％乙蒜素乳油及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于在2017年9月在广西省百色市凌云县朝里瑶族乡进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表6：
表6恶喹酸对柑橘溃疡病药效试验
从表6可以看出，恶喹酸农药制剂对柑橘溃疡病的防治效果优于对照药剂80％乙蒜素乳油防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例7防治马铃薯黑胫病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为58％甲霜·锰锌可湿性粉剂及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于2017年4月在河北省承德市隆化县步古沟镇进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表7：
表7恶喹酸对马铃薯黑胫病药效试验
从表7可以看出，恶喹酸农药制剂对马铃薯黑胫病的防治效果优于对照药剂58％甲霜·锰锌可湿性粉剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例8防治水稻基腐病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为3％甲霜·恶霉灵水剂及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于在2017年9月在江苏省盐城市滨海县八滩镇进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表8：
表8恶喹酸对水稻基腐病药效试验
从表8可以看出，恶喹酸农药制剂对水稻基腐病的防治效果优于对照药剂3％甲霜·恶霉灵水剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例9防治梨枝枯病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为58％甲霜·锰锌可湿性粉剂及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于在2018年8月在新疆维吾尔自治区巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市阿瓦提乡进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表9：
表9恶喹酸对梨枝枯病药效试验
从表9可以看出，恶喹酸农药制剂对梨枝枯病的防治效果优于对照药剂58％甲霜·锰锌可湿性粉剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
实施例10防治猕猴桃溃疡病田间药效实验
1.实验处理：本实验根据成分的不同分别设三个处理浓度，对照药剂为47％春雷·王铜可湿性粉剂及空白清水。
2.试验方法：试验区域为每个小区66.7m2，重复3次；施药前调查及施药后的防效调查方法为：在实验处理区内随机取样5点，按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。
本发明实验于在2018年8月在陕西省西安市周至县集贤镇进行，按每亩有效成分2g、3g和4g兑水进行均匀喷雾，共施药1次，药后7天、14天和21天查看的防治结果见表10：
表10恶喹酸对猕猴桃溃疡病药效试验
从表10可以看出，恶喹酸农药制剂对猕猴桃溃疡病的防治效果优于对照药剂47％春雷·王铜可湿性粉剂防治效果，且恶喹酸农药制剂的持效期更长，试验结果也表明此剂量下的恶喹酸农药制剂对作物安全无药害。
从以上10个生测实施例可知，恶喹酸作为农药活性成分可制成悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、颗粒剂、水乳剂，微乳剂或超低容量液剂，对芒果细菌性角斑病、菜豆细菌性疫病、白菜软腐病、水稻白叶枯病、柑橘溃疡病、马铃薯黑胫病、水稻基腐病、梨枝枯病和猕猴桃溃疡病有显著的防治效果，且杀菌效果明显，弥补了恶喹酸在国内农药使用的空白，喹啉酮类杀菌剂抗药性低，不会与其他药物产生相互抗性，同时对作物安全，持效期长，省力省时，提高了农药的使用效率，是防治此类细菌病害的理想药剂，在生产上有广泛的应用前景。
综上所述，本发明的具有杀菌活性的化合物为恶喹酸，首先进行室内杀菌活性测试，再进行田间药效测试，杀菌效果显著。同时对作物安全，持效期长，符合农药制剂的安全性要求。
本发明的具有杀菌活性的化合物恶喹酸在农业上的使用已经通过具体的实例进行了描述，本领域技术人员可借鉴本发明内容，适当改变原料、工艺条件等环节来实现相应的其它目的，其相关改变都没有脱离本发明的内容，所有类似的替换和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的，都被视为包括在本发明的范围之内。